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ENTEROBACTERIACEAE
Eschericha coli
GENERALIDADES
- Bacilos Gram negativos
- Aislamientos bacterianos recuperados con más frecuencia de muestras clínicas.
- Distribuidos ampliamente en la naturaleza: SUELO, AGUA, PLANTAS
ENTEROBACTERIAS
- son colonizadores normales del tracto intestinal de seres humanos y animales
- No se encuentran normalmente en sitios corporales fuera del tracto gastrointestinal
GENERALIDADES
- Pueden estar relacionados con cualquier tipo de enfermedad infecciosa, en particular sistema genito urinario.
- Individuos con compromisos en las barreras anatómicas normales.
- Heridas traumáticas contaminadas, insiciones abdominales
- ocurre infección por estas bacterias:
- neumonía, septicemia, meningitis o formación de abscesos.
DIARREA Y DISENTERÍA
GENERALIDADES
- Pacientes inmunocomprometidos o debilitados son altamente susceptibles a infecciones adquiridas en hospitales
- se hallan estos m.o. entre las causas principales de infecciones intrahospitalarias
ENTEROBACTERIAS
Estas bacterias constituyen el 80% de las cepas GN aisladas en laboratorios clínicos y la mitad de las clínicamente significativas
ENDOTOXINA
- LPS: porción variable externa de CH: ESPECIFICIDAD ANTIGÉNICA.
- Estructura interna de polisacáridos que es estructuralmente similar entre especies.
- Una porción lipídica central : LIPIDO A ALTAMENTE CONSERVADA
SEPSIS GRAM NEGATIVOS
- Fiebre
- Leucopenia
- Hemorragia capilar
- Hipotensión
- Colapso circulatorio
- Lipido a : altamente antigénico con determinantes comunes a todas las cepas de bacterias gram negativas.
PLASMIDO
- Resistencia antimicrobianos.
- betalactamasas
CARACTERISTICA PARA UNA IDENTIFICACIÓN PRESUNTIVA
GRAM:
- cel bacilares y cocobacilares.
- Gram negativos cortos y gordos
- 0.5 a 2 um de ancho a 2 a 4 um de largo
Características morfológicas de las colonias:
- Mucoides o secas
- relativamente grandes
- color gris a opacas en agar sangre.
- La hemòlisis es variable y no es distintiva
- Colonias rojas en agar Mac conkey o brillo metálico en EMB.
- Presencia o ausencia de enzimas codificadas por el cromosoma bacteriano.
- Las enzimas dirigen el matabolismo microbiano que pueden ser detectados por la utilización de medios de cultivo.
- Perfil bioquimico: características metabólicas.
CARACTERISTICAS DE REVELAMIENTO
- Identificacion definitiva: p. bioquimicas
- Con pocas excepciones, todos los miembros de Enterobacteriaceae demuestran las siguientes características:
- Fermentación de glucosa con producción de ácido, con o sin gas
- Citocromo oxidasa negativo
- Reducción de nitrato a nitrito
UTILIZACIÓN DE LOS HIDRATOS DE CARBONO
- Fermentacion: entorno anaerobio.
- Compuesto orgánico aceptor de electrones.
- En pruebas bacteriológicas el proceso se detecta por la observación de cambio de color de los indicadores de pH como consecuencia de la formación de ácidos
FERMENTACIÓN
- Proceso metabólico de oxido-reducción que tiene lugar en un entorno anaeróbico, en el que el sustrato orgánico sirve como aceptor final de hidrógenos (electrones) en lugar de oxigeno
- Fermentadores de lactosa o no fermentadores de lactosa
- Se detecta por cambio de color del indicador de pH como consecuencia de la formación de productos ácidos
ROJO DE METILO
VIA BUTILENGLICOLICA KLEBSIELLA ,HAFNIA, SERRATIA
METABOLISMO
- Algunas especies bacterianas producen CO2.
- Microorganismos que producen cantidades abundantes de CO2
- Formacion de alcohol etilico
FERMENTACIÓN DE LA LACTOSA( glu-gal)
- Es más compleja que la glucosa.
- Unido por un enlace galactosido.
- Beta galactosido permeasa
- Beta galactosidasa
FERMENTADORES DE LA LACTOSA TARDIOS
- Son microorganismos que exhiben actividad beta galactosidasa pero muestra baja actividad beta galactosido permeasa.
- PRUEBA ONPG( orto Nitrofenil B-D galactosido) SIMILAR A la lactosa solo que la glucosa ha sido remplazada por un grupo o nitrofenilo
MEDIOS DE CULTIVO UTILIZADOS PARA LA DETECCIÓN DE FERMENTACIÓN DE HC
FERMENTACION DE LA GLUCOSA
- La ausencia de fermentación excluye a cualquier microorganismo de pertenecer a la familia Enterobacteriaceae
MEDIOS PARA RECUPERACIÓN DE ENTEROBACTERIAS
- Medios no selectivos para aislamiento primario. Ej: AGAR SANGRE
- AGAR SELECTIVO Y DIFERENCIAL.
CALDOS DE ENRIQUECIMIENTO
- Caldo selenito
- Caldo gram negativos
INDICACIONES PARA LA ELECCIÒN DE MEDIOS DE AISLAMIENTO SELECTIVOS
- Inocular la muestra directamente en placas de agar Mac conkey o EMB para aislamiento primario de todas las especies de bacilos entericos Gram negativos
- Inocular directamente o en placas de agar XLD O HE para INVESTIGAR salmonella- Shigella.
- Enriquecer una pequeña porción de la muestra en caldo selenito o Gram negativos
ESTRUCTURA ANTIGÉNICA
- Antígenos somáticos O (LPS)
- Antígenos capsulares K
- Antígenos Flagelares H
Flagelos (H)
Cadenas laterales (O)
del LPS
Cápsula (K) CAPSULA
(antígeno K)
LPS (endotoxina, antígeno O)
FACTORES DE VIRULENCIA
Adhesinas: PILIS O FIMBRAS: inhiben la capacidad de ser fagocitado.
- Endotoxina
- Cápsula Variación de fase antigénica
- Exotoxina-enterotoxinas
- Supervivencia y multiplicación dentro de la célula
- Secuestro de factores de crecimiento aerobactina
- Resistencia a los antimicrobianos
CLASIFICACION ENTEROBACTERIACEAE
1.TRIBU I
2.TRIBU II
3.TRIBU III
4.TRIBU IV
ESCHERICHIA COLI
- Escherichia coli, infecciones diarreicas
- Es el m.o. más común causantes de diarreas.
- Existen cinco variedades patógenas y c/u de ellas presenta un mecanismo distinto de producir la enfermedad.
- Escherichia coli se clasifican por las características de sus propiedades de virulencia.
- Las propiedades de adherencia a las células epiteliales de los intestinos grueso y delgado son codificados por genes presentes en plasmidios.
- Con frecuencia las toxinas son mediadas por plasmidios o por fagos
Existen 5 especies pertenecientes al género Escherichia, de estas sobresale Escherichia coli por su importancia clínica.
Constituyente de la microbiota normal
Algunas cepas tienen la capacidad de producir cuadrosndiarreicos
Existen 5 grupos, los cuales desarrollan síndromes díarreicos
- Escherichia coli enterohemorragica ECEH
- Escherichia coli enterotoxigénica ECET
- Escherichia coli enteroinvasora ECEI
- Escherichia coli enteropatogéniaca ECEP
- Escherichia coli enteroagregativa ECEA
ENFERMEDAD DIARREICA AGUDA
Presencia de deposiciones líquidas o acuosas, generalmente en número mayor a tres en 24 horas y con duración inferior a los 14 días.
La Enfermedad Diarreica Aguda a nivel mundial ocasiona la muerte de aproximadamente 4 a 6 millones de personas cada año, siendo una de las patologías que en niños menores de 5 años ocasiona alrededor de 800.000 casos.
TIPOS DE DIARREA
- Diarrea secretora
- Diarrea tipo osmótico
- Diarrea exudativa o inflamatoria
ESCHERICHIA COLI
DIARREA TOXÍGENA O SECRETORA
DIARREA INVASIVA O INFLAMATORIA
DIARREA OSMÓTICA
PATOGENIA
TIPOS DE DIARREA SEGÚN LA CLÍNICA
ESCHERICHIA COLI PRODUCTORES DE DIARREA
MICROORGANISMO LUGAR DE ACCIÓN ENFERMEDAD PATOGENIA
ECET.
- Intestino delgado
- Diarrea del viajero.
- diarrea infantil en países subdesarrollados.
- diarrea acuosa
- retorcijones
- Nàuseas.
- Enterotoxinas termoestables ST y/o termolabiles LT;
- NO dañan el epitelio de la mucosa.
- estimula la actividad guanilato o adenilatociclasa con perdida de líquidos y electrólitos.
CUADRO CLÍNICO
- Diarrea acuosa, fiebre, dolor abdominal, retorcijones.
- Corta evolución (3-4 d)
- Sin sangre, moco o pus, fiebre inhabitual, muy ocasionalmente se manifiesta como un cuadro semejante al cólera.
MECANISMO PATOGÉNICO
- La gastroenteritis es mediada por la presencia de enterotoxina: Termolabil(LT) y termoestable (ST)
- Colonización de la mucosa intestinal mediada por fimbrias
- Las toxinas incrementan la concentración intracelular de monofosfato cíclico, e inhiben la absorción de cloruro sódico, lo que induce a una secreción intestinal neta
- Dosis infectante alta 108 UFC.
- agua o alimentos contaminados con heces
- Unión superficial de las células bacterianas a las células del epitelio intestinal como prerrequisito para la producción de la toxina.
TRATAMIENTO
- Una vez presente la diarrea el uso de antibióticos reduce la duración
- Con Trimetoprima-sulfametoxazol o con fluoroquinona se trata la diarrea del viajero
ESQUEMA PATOGÉNICO DE ECET
- Fimbrias
- ECET
- Liberación de enterotoxinas LT o ST
SEROTIPOS DE ESCHERICHIA COLI
- 06 080
- 08 085
- 015 092
- 020 0115
- 025 0128ac
- 027 0139
- 063 0148
- 078 0153
- 0167
ESCHERICHIA COLI ENTEROINVASIVA - ECEI
- Union a la mucosa del colon- invasion de la mucosa y la làmina propia.
- Fiebre, retorcijones, diarrea acuosa seguida por cuadro disentérico con heces sanguinolentas escasas.
- Invasión y destrucción de las células epiteliales que tapizan el colòn.
- Invaden la célula huésped y provocan una respuesta inflamatoria significativa en la mucosa intestinal.
- La infección es más común en niños, en países en vías de desarrollo, población susceptible: toda
- Mecanismo Patogénico:
- Invasión y multiplicación en células epiteliales del intestino ulceración superficial.
- Dosis infectante 104-105 ufc
- Tratamiento:
- Reposición hídrica
- El uso de antibióticos no es necesario en casos graves Trimetropinasulfametoxazol o cefalosporina de tercera generación
SEROGRUPOS
- 028ac
- 029
- 011
- 0124
- 0136
- 0143
- 0144
- 0152
- 0164
CUADRO CLÍNICO
- Disentería, dolor abdominal, retorcijones, frecuentes deposiciones de poco volumen, tenesmo doloroso, diarrea acuosa en sus inicios.
- se continua con evacuación intestinal con sangre, moco y pus.
- leucocitos en las heces, diarrea sanguinolenta
ESCHERICHIA COLI ENTEROPATOGENA - ECEP
- Intestino delgado
- Diarrea infantil( MENORES DE 1 AÑO) con fiebre, nauseas, vómitos,
- Heces sin sangre.
- Adherencia y destrucción de las células epiteliales mediadas por plàsmidios.
- No produce toxinas, no es invasiva.
- Agente importante de diarrea en lactantes, en países en vías de desarrollo: Diarrea infantil.
- Localización de la infección intestino delgado.
MECANISMO PATOGÉNICO
- Adherencia localizada a nivel de las membranas enterocìticas.
- No se adhieren en forma uniforme.
- Pili tipo iv al epitelio.
- Forman microcolonias diferenciadas.
- colonización de la mucosa por genes plasmidiales (bfp)
- Hacen que los niveles de calcio dentro de la célula aumenten y los micro vellosidades desaparezcan.
- Adhesina intimina favorece una fuerte adherencia .
- Proliferación de actina filamentosa debajo de cada bacteria ADHERIDA
- formación de unión en pedestal mediada por gen cromosomal eae,
- Produce lesión histológica característica.
CIERTO GRADO DE PENETRACIÒN
- El mecanismo de producción de la diarrea se debe por la alteración en el transporte de iones y por la mala absorción debido a la alteración de la microvellosidad.
EPIDEMIOLOGÍA
- Es una causa importante de diarrea en los países en vías desarrollo.
- Transmisión fecal-oral, mediante contaminación de manos,alimentos, leche, fomites.
- Dosis infectante 105 ufc.
- Reservorio niños con infeción asintomática o sintomáticas
- Colastro y leche materna protegen contra ECEP
- Tratamiento:
- Pevenir y cortar la deshidratación
- el uso de antibióticos puede acortar duración de la diarrea:
- cotrimoxazol,neomicina por 5 días
MODELO DE LA ADHERENCIA DE EPEC A CÉLULAS EPITELIALES Y FORMACIÓN DE LA LESIÓN A/E
- Adherencia inicial a microvellosidades mediada por BFP
- Transducción de señales mediada por proteinas secretadas
- por EPEC, codificadas por LEE
- Adherencia intima, mediada por intimina,
LESIÓN EN PEDESTAL
SEROGRUPOS
- 055
- 086
- 0111
- 0119
- 0126
- 0127
- 0128ab
- 0142
ESCHERICHIA COLI ENTEROPATOGENA
ESCHERICHIA COLI ENTEROHEMORRAGICO - ECEH
- Es la unica categoria zoonotica heces de bovinos, amplio reservorio en animales carne mal cocida.
- Serotipos: O157:H7, O26:H11
- Produce una toxina similar a la shiga (SLT), también llamada verotoxina
- Población susceptible: toda
- Cuadro Clínico:
- Varia desde diarrea leve sin complicaciones, hasta colitis hemorrágica con dolor abdominal intenso, diarrea sanguinolenta y fiebre escasa o nula, vómitos.
- Periodo de incubación de 3 a 4 días, el cuadro se puede prolongar por 4 a 10 días
- Dosis infectante muy baja 100- 200
- El síndrome hemolítico urémico se asocia a este m.o., esta enfermedad puede producir insuficiencia renal aguda
- Mediada por verotoxina
- Citotóxica bloquea la sintesis de proteìnas
- Los microorganismos se adhieren a las células del colon y producen verotoxinas.
- Ausencia de PMN en heces.
VEROTOXINAS
- VEROTOXINA 1: Toxina shiga.
- Subunidad A y B se enlaza con globotriaosilceramida Gb3 y permite que la subunidad a entre a la cèlula.
- Bloqueando la sintesis proteica.
- VEROTOXINA 2:
TRATAMIENTO
- Corrección del trastorno hidroelectrico y manejo de las complicaciones.
- Uso de los antibioticos es controvertido
- Se debe educar a la población
ENTEROHEMORRAGIA
- Asociado con colitis hemorragia y sindrome urèmico hemolìtico.
- Colitis:
- Clambres abdominales
- Diarrea acuosa
- Descarga hemorragica
- No hay fiebre ni celulas inflamatorias en materia fecal.
- Suh:
- Daño renal agudo
- Trombocitopenia
- Anemia hemolìca
ESCHERICHIA COLI ENTEROAGREGATIVA - ECEAg
- Intestino delgado Diarrea infantil
- persistente, a veces teñidas con sangre, fiebre ligera
- Adherencia agregativa MEDIADA POR PILIS FORMANDO MACIZOS.
- No invasivas
- Mediada por plasmido 60
- MDa
BACTERIAS PRODUCTORAS DE TOXINAS ENTÉRICAS
FISIOPATOLOGIA DE LA DIARREA
- La diarrea ocurre cuando hay un desequilibrio entre la absorción y secreción intestinal de líquidos; como consecuencia aumenta el volumen y consistencia de las deposiciones
TIPOS DE INFECCIONES ENTERICAS
FACTORES DEL MICROOORGANISMO
- Adhesión
- CFA (Factor antigénico de colonización) = ECET
- BFP (Pili formador de paquetes)= ECEP
- Producción de Toxinas
- Neurotoxinas
- Staphylococcus aureus
- Bacillus cereus
- Citotoxinas
- Shigella
- Clostridium perfringes
- Enterotoxinas
- Otros factores
- Vibrium cholerae = Mucinasa
ENTEROBACTERIAS
- Las Enterobacterias son un vasto grupo heterogeneo de bacilos Gramnegativos cuyo habitat natural es el intestino de humanos y animales.
- Esta Familia incluye muchos generos entre los que se encuentran: Escherichia, Shigella, Salmonella, Enterobacter, Klebsiella, Serratia, Proteus.
- Las Enterobacterias fermentan una amplia variedad de carbohidratos, poseen una estructura antigenica compleja y producen varias toxinas y otros factores de virulencia.
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- La familia enterobacteriaceae muestra las siguientes caracteristicas:
- Son bacilos gramnegativos dotados de motilidad por flagelos peritricos o carentes de motilidad.
- Crece en condiciones aerobias y anaerobias (son anaerobios facultativos).
- Fermentan la glucosa en vez de oxidarla y con frecuencia producen gas.
- Son catalasa positiva, oxidasa negativa y reducen el nitrato a nitrito.
- Crecen facilmente en medios comunes.
- En cuanto a la identificacion presuntiva rapida que hay para los generos de las bacterias entericas gram-negativas tenemos:
- FERMENTADORES: escherichia, enterobacter, klebsiella
- NO FERMENTADORES: salmonella , proteus
- FERMENTADORES LENTOS: citrobacter, serratia
ESCHERICHIA SPP
- Esta bacteria puede presentarse tanto como um agente primario como secundario.
- Las muestras utilizadas a nivel de avicultura son los sacos aéreos, hígado, bazo, corazón, pericardio, MO, articulaciones, saco vitelino (pollitos).
- Mas del 90% de las E. coli aisladas son positivas para ß-glucoronidasa con el empleo del sustrato 4-metilumbeliferil-B-glucoronido (MUG), caracteristicas claves en el momento de la identificacion.
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